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A investigação do local de crime é um dos processos mais importantes para solucioná-lo e as manchas de sangue são um dos vestígios mais comumente encontrados, pois fornecem muitas informações sobre o ocorrido. A capacidade de determinar o tempo desde a sua deposição (TSD, time since deposition) pode ser útil nos casos em que nenhum corpo é encontrado, dando informações sobre o tempo de morte ou do delito. Este estudo desenvolveu um método espectrofotométrico UV-Vis para estimar TSD de manchas de sangue empregando recursos disponíveis na Polícia Científica do Paraná. Alíquotas de 5 ìL de sangue fresco foram depositados em microtubos transparentes e deixadas em repouso por tempo determinado de cada leitura. Foram coletados os fragmentos de sangue dessecados em diferentes datas, solubilizados em 1,5 mL de solução de tampão Tris-HCl pH 8,0, sonicados por 45 s e centrifugados a 13.000 rpm a -10 °C por 5 min. O sobrenadante foi transferido para cubetas descartáveis e submetidas a leitura em espectrofotômetro UV-Vis, em modo scan, na faixa de 300 a 700 nm com intervalos de 0,1 nm. Observou-se alteração no comportamento espectrofotométrico do sangue em função do TSD, especialmente em relação à área e ao deslocamento hipsocrômico da banda de Soret. O desenvolvimento desse método de estimativa de TSD de manchas de sangue por espectrometria UV-Vis é justificado pelo baixo custo operacional, simplicidade de aplicação e reduzido consumo de amostra.